来自邓云庆的问题
CTAB法提取DNA的原理和步骤?
CTAB法提取DNA的原理和步骤?
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2020-08-29 00:50
CTAB法提取DNA的原理和步骤?
CTAB法提取DNA的原理和步骤?
1)取材料,加液氮研磨成粉末状,迅速移入1.5mlEppendorf管中;
(2)加入800μl的CTAB提取缓冲液,混匀(CTAB在65℃水浴预热),每5min轻轻震荡几次,20min后12000r/min,离心15min;
(3)小心吸取上清液,加入等体积的酚:氯仿(各400μl)溶液,混匀,4℃,12000r/min,离心10min;
(4)小心吸取上清液,加入等体积的氯仿,混匀,4℃,12000r/min,离心10min.
(5)重复步骤(4)1-2次,以蛋白层不出现为止;
(6)取上清,-20℃沉淀1h,4℃,12000r/min,离心10min;
(7)弃去上清液,用70%乙醇洗涤沉淀2次;
(8)室温下干燥后(一般干燥5-15min),溶于30-50μlDEPC去离子水中,于-20℃或者-70℃下保存备用.