1方法与原理

　　生化需氧量是指在规定条件下,微生物分解存在水中的某些可氧化物质,特别是有机物所进行化学过程中消耗溶解氧的量.BOD5是指在20+1℃培养5d分别测定样品培养前后的溶解氧,二者之差即为BOD5值,以氧的mg/L表示,测试范围2mg/L～6000mg/L.

　　2仪器

　　2.1恒温培养箱（20±1℃）

　　2.2300mL细口玻璃瓶

　　2.31000mL量筒

　　2.4玻璃搅棒

　　棒的长度长于普通玻璃棒,在棒的底端固定一个直径比量筒底小,并带有几个小孔的硬橡胶板.

　　2.5溶解氧瓶：300mL,带有磨口玻璃塞并且有供水封用的钟形口.

　　2.61、2、5、10、20mL吸量管：供分取水样和添加稀释水用.

　　3试剂

　　3.1磷酸盐缓冲溶液

　　将8.5g磷酸二氢钾,21.75g磷酸氢二钾,33.4g七水合磷酸氢二钠和1.7g氯化铵溶于水中,稀释至1000mL,此溶液的pH值应为7.2.

　　3.2硫酸镁溶液

　　将22.5g七水合硫酸镁溶于水中,稀释至1000mL.

　　3.3氯化钙溶液

　　将27.5g无水氯化钙溶于水,稀释1000mL.

　　3.4氯化铁溶液

　　将0.25g六水合氯化铁（FeCl3•6H2O）溶于水中,稀释至1000mL.

　　3.5盐酸溶液

　　将40mL（=1.18mg/L）盐酸溶于水,稀释至1000mL.

　　3.6氢氧化钠溶液（0.5mol/L）

　　将20g氢氧化钠溶于水中,稀释至1000mL.

　　3.7亚硫酸钠溶液(=0.025mol/L)

　　将1.575g亚硫酸钠溶于水中,稀释至1000mL.（此溶液不稳定,需每天配制.）

　　3.8葡萄糖-谷氨酸标准溶液

　　将葡萄糖和谷氨酸在103℃干燥1h后,各称取150mg溶于水中,移入1000mL容量瓶内稀释至标线,混合均匀.此标准溶液临用前配制.

　　3.9稀释水

　　在5-20L玻璃瓶内装入一定量水.控制水温在20℃左右,然后用无油空气压缩机,将吸入的空气经活性碳吸附管及洗涤管后,导入稀释水内曝气2-8h.使稀释水中的溶解氧接近饱和.放置于20℃培养箱中放置数小时.使水中的溶解氧达到8mg/L左右,临用前每升加入氯化钙、氯化铁溶液、硫酸镁溶液、磷酸盐缓冲液各1mL,并混合均匀,稀释水的PH值应为7.2.其BOD5应为小于0.2mg/L.

　　3.10接种液

　　城市污水,在室温下放置一昼夜,取上清液使用.

　　3.11接种稀释水

　　分取适量接种液,加入稀释水中、混匀.每升稀释水中接种液加入量为：生活污水1～10mL.接种液配置后立即使用.

　　4分析步骤

　　4.1水样的预处理

　　4.1.1调节pH值

　　a）水样的PH若超出6.5-7.5范围时,可用盐酸或氢氧化钠稀溶液调节PH近于7,但用量不要超过水样体积的0.5%.若水样的酸度或碱度很高,可改用高浓度的碱或酸液进行中和.保持20℃的水样温度.

　　b）确定稀释倍数：

　　由重铬酸钾法测定的COD值来确定,通常需做三个稀释比.使用稀释水时,由COD值分别乘以系数0.075、0.15、0.225,即可得三个稀释倍数；使用接种稀释水时,则分别乘以0.075、0.15、0.25三个系数.

　　c）稀释操作

　　按照选定的稀释比例,用虹吸沿筒壁先引入部分接种稀释水于1000mL量筒中.加入需要量的均匀水样.再加入接种稀释水至1000mL,用带胶板的玻璃棒搅拌均匀,搅拌时防止出现气泡.然后以虹吸法将约20℃的混匀水样转移入两个溶解氧瓶内,转移过程中应注意不使产生气泡,以相同的操作使两个溶解氧瓶充满水样后溢出少许,加塞.瓶内不应留有气泡.其中一瓶即测定溶解氧,另一瓶的瓶口进行水封后,放入培养箱,在20+1℃培养5d,在培养过程中注意添加封口水.5d后测定其溶解氧.

　　另外取两个溶解氧瓶用相同的方法装满接种稀释水作为空白试验,其中一瓶即测定溶解氧,另一瓶瓶口进行水封后,放入培养箱,在20+1℃培养5d,在培养过程中注意添加封口水.5d后测定其溶解氧.

　　五结果计算

　　经过稀释后的水样的BOD5按下式（4）计算：

　　……………………（4）

　　式中：

　　C1——水样在培养前的溶解氧浓度,mg/L；

　　C2——水样经5d培养后,剩余溶解氧浓度,mg/L；

　　B1——接种稀释水在培养前的溶解氧浓度mg/L；

　　B2——接种稀释水在培养后的溶解氧浓度,mg/；

　　f1——接种稀释水在培养液中所占比例；

　　f2——水样在培养液中所占比例.