图1表示含有目的基因D的DNA片段及其中部分碱基序列,图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列.现有MpsⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶.它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C
图1表示含有目的基因D的DNA片段及其中部分碱基序列,图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列.现有MpsⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶.它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG.现要培育含目的基因D的大肠杆菌,请回答下列问题:
(1)为了提高试验成功率,需要通过PCR扩增目的基因,以获得目的基因的大量拷贝,该过程除需目的基因和dNTP (包括dATP、dGTP,dCTP、dTTP)之外还需提供___和___.
(2)图2中,启动子的作用是___.
(3)分别用4种限制酶切割图1中的DNA片段,能形成黏性末端的是___.
(4)若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接,形成重组质粒,那么应选用的限制酶是___.为了提高重组质粒导入大肠杆菌的成功率,需将大肠杆菌用___进行处理.
(5)为了筛选出成功导入含目的基因D的重组质粒的大肠杆菌,首先将大肠杆菌图3所示的培养基上培养,得到如图3的菌落.再将灭菌绒布按到培养基上,使绒布面沾上菌落,然后将绒布按到图4所示的培养基上培养,得到如图4的结果(空圈表示与图3对照无菌落的位置).请推测:图3和图4培养基里含的抗生素分别是___,___.图4中生长的大肠杆菌中是否有目的基因D?___.