是不是同一个样品不同时间做出来的保留时间差别较大?

　　保留时间影响因素比较多,如果已经确定pH值影响不大,可以从以下几个方面进行考虑：

　　1.流动相的比例,最好保证有机相的比例一致,保存及超声脱气的时候用封口膜封一下,减少有机相挥发,也不要放置太长时间

　　2.柱温是否恒定,柱温在一定程度上会影响保留值,最好设为定值,不要设为不控制

　　3.色谱柱有没有更换,不同厂家的同一类型色谱柱由于填充技术、制备工艺的不同,在同样色谱条件下对同一组分的保留情况会有所不同,即使是同一厂家的也会有这种情况

　　4.液相系统是否更换,不同的色谱仪的管路长短不同,会使走样时柱压不同,柱压也会影响出峰时间和峰形,原理类似于加压过柱

　　5.如果是梯度洗脱,要保证平衡时间足够长,否则也会引起保留值改变