【微生物诱变后的筛选环节极为繁杂,定向筛选常用来筛选营养缺陷-查字典问答网
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  【微生物诱变后的筛选环节极为繁杂,定向筛选常用来筛选营养缺陷型突变株.无氮MM培养基(基本培养基)仅能满足野生型菌株生长需要,该培养基中营养缺陷型菌株能存活但不能繁殖.CM培】

  微生物诱变后的筛选环节极为繁杂,定向筛选常用来筛选营养缺陷型突变株.无氮MM培养基(基本培养基)仅能满足野生型菌株生长需要,该培养基中营养缺陷型菌株能存活但不能繁殖.CM培养基(完全培养基)可满足营养缺陷型菌株营养需要.已知青霉素能抑制细菌细胞壁的生物合成.据图回答下列相关问题:

  (1)据培养结果推测:1培养皿中是___培养基,2培养皿中是___培养基,MM培养基浓缩缺陷型后需洗涤和稀释,才能涂平板进行母皿CM培养,假设只进行10-1,10-2和10-3三级梯度稀释,简述获得第三级梯度10-3的操作步骤:___.

  (2)诱变后筛选出的营养缺陷型菌株是___.为验证该菌株是营养缺陷型,可以___.

  (3)MM培养基加青霉素的目的是___,加青霉素后培养能浓缩缺陷型的原因是___.

  (4)无氮MM培养基培养2小时的目的是___.

1回答
2020-11-05 02:39
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隋志坚

  (1)无氮MM培养基(基本培养基)仅能满足野生型菌株生长需要,该培养基中营养缺陷型菌株能存活但不能繁殖.CM培养基(完全培养基)可满足营养缺陷型菌株营养需要.根据图中显示1号培养基上微生物数目较多,2号数目较少,可以推断出:1培养皿中是CM(或完全)培养基,2培养皿中是MM(或基本)培养基.假设只进行10-1,10-2和10-3三级梯度稀释,可以用稀释涂布平板法,获得第三级梯度10-3,具体操作步骤:从10-2稀释液中取样1mL,加9mL无菌水摇匀,弃去1mL,即是10-3梯度.

  (2)由于CM培养基(完全培养基)可满足营养缺陷型菌株营养需要.因此诱变后筛选出的营养缺陷型菌株在MM培养基上不生长,在CM培养基上能生长的菌落.为验证该菌株是营养缺陷型,可以重复实验,将菌株再次接种在MM和CM培养基,对比生长状况.

  (3)青霉素可以抑制细菌细胞壁的生物合成,用于淘汰野生型菌株.由于青霉素能抑制细胞壁的合成,野生型因能在MM培养基繁殖而被杀死(营养缺陷型因不能在MM培养基繁殖而被保留),因此加青霉素后培养能浓缩缺陷型.

  (4)为了保证诱变出的营养缺陷型不繁殖,防止营养缺陷型因分裂遭误杀(或耗净营养缺陷型在CM培养基中吸收的营养物质),无氮MM培养基培养2小时.

  故答案为:

  (1)CM(或完全) MM(或基本) 从10-2稀释液中取样1mL,加9mL无菌水摇匀,弃去1mL,即是10-3梯度

  (2)在MM培养基上不生长,在CM培养基上能生长的菌落 将菌株再次接种在MM和CM培养基,对比生长状况

  (3)抑制细菌细胞壁的生物合成,用于淘汰野生型菌株 青霉素能抑制细胞壁的合成,野生型因能在MM培养基繁殖而被杀死(营养缺陷型因不能在MM培养基繁殖而被保留)

  (4)保证诱变出的营养缺陷型不繁殖,防止营养缺陷型因分裂遭误杀(或耗净营养缺陷型在CM培养基中吸收的营养物质)

2020-11-05 02:39:41

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