【在某些深海鱼中发现的抗冻蛋白基因afp对提高农作物的抗寒能力有较好的应用价值．如图所示是获得转基因莴苣的技术流程，请据图回答下列问题：（1】

　　在某些深海鱼中发现的抗冻蛋白基因afp对提高农作物的抗寒能力有较好的应用价值．如图所示是获得转基因莴苣的技术流程，请据图回答下列问题：

　　（1）获取目的基因的主要途径包括从自然界已有的物种中分离和 ．

　　（2）①过程需要的酶有 、 ．

　　（3）重组质粒除了带有抗冻蛋白基因afp以外，还必须含有启动子、终止子和 ，这样才能构成一个完整的基因表达载体．

　　（4）如果受体细胞C1是土壤农杆菌，则将目的基因导人它的目的是利用农杆菌的 ，使目的基因进入受体细胞C2，并将其插入到受体细胞C2中 上，使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达，形成转基因莴苣．经②过程获得的转基因莴苣中的目的基因是否表达，在分子水平上可用 法进行检测，如果出现杂交带，说明目的基因已经表达蛋白质产品，转基因莴苣培育成功．