博凌科为-为你两步法RT-PCR比较常见,在使用一个样品检测多个mRNA时比较有用.然而一步法RT-PCR具有其他优点.一步法RT-PCR在处理大量样品时易于操作,有助于减少残余污染,因为在cDNA合成和扩增之间不需要打开管盖.一步法可以得到更高的灵敏度,最低可以达到0.1pg总RNA,这是因为整个cDNA样品都被扩增.对于成功的一步法RT-PCR,一般使用反义的基因特异性引物起始cDNA合成.一步法两步法起始第一链cDNA合成使用：起始第一链合成使用Oligo(dT)GSP引物随机六聚体GSP引物优点优点灵活方便引物选择扩增酶同逆转录酶预先混合扩增酶的选择转管步骤少,减少污染可能性困难RT-PCR的优化能力高灵敏度同Platinum酶结合提高特异性适用于大量样品分析同PlatinumPfxTaqDNA聚合酶结合提高忠实性适用于定量PCR适用于在单个样品中检测几个mRNA