（1）利用PCR技术扩增目的基因时，由于DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链，因此要用两种引物才能确保DNA两条链同时被扩增；引物I延伸而成的DNA单链会与引物Ⅱ结合，进行DNA的延伸，这样，DNA聚合酶只能特异地复制处于两个引物之间的DNA序列；一个DNA分子三轮复制以后，含有两种引物的DNA分子有23-2=6个．

　　（2）基因工程的核心步骤是构建基因表达载体，其目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，表达和发挥作用，并可遗传给下代．

　　（3）将目的基因导入微生物细胞常用感受态细胞法，即用Ca2+处理细胞，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，这种细胞称为感受态细胞．

　　（4）检测目的基因是否发挥功能作用的第一步是目的基因是否能转录形成mRNA．

　　故答案为：

　　（1）DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链，用两种引物才能确保DNA两条链同时被扩增 处于两个引物之间 6

　　（2）构建基因表达载体 稳定存在，表达和发挥作用

　　（3）感受态

　　（4）目的基因是否能转录形成mRNA