分子生物学试题:已知原核生物的A、B、C三个基因的序列,设计-查字典问答网
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来自马晓岩的问题

  分子生物学试题:已知原核生物的A、B、C三个基因的序列,设计实验证明这三个基因在同一个操纵子上,并且找出这三个基因的排列顺序?找出这三个基因的顺序如ABC或其他。老师说是利用mRNA提

  分子生物学试题:已知原核生物的A、B、C三个基因的序列,设计实验证明这三个基因在同一个操纵子上,

  并且找出这三个基因的排列顺序?

  找出这三个基因的顺序如ABC或其他。老师说是利用mRNA提取——用RT-PCR合成cDNA——用得到的cDNA进行PCR扩增——最后对得到DNA进行琼脂糖凝胶电泳观察,而且关键在中间第二步的引物设计。但我不能明白具体的原理。

1回答
2019-08-14 08:23
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陈武栋

  咳,是这样,原核生物没有内含子,不会有扩增上面的影响,比如引物结合的位置不对引起的后续这种.这个问题其实没那么复杂,假定这个基因序列是ABC,如果设计了A的引物,扩增出来的产物就主要是含有ABC的大片段;如果是设计B的引物,就有BC的片段;如果是C的引物,就只是C的片段,在大小上就能分离出来.你用marker估算一下三种片段的大小,M(abc)-M(bc)=M(a),同样的M(bc)-M(c)=M(b),你再与自己已知的大小对照一下.

2019-08-14 08:24:38

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