Km等于酶促反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度,即当V=Vm/2时,【S】=Km,单位为mol/l.Km是酶极为重要的动力学参数,其物理含义是指ES复合物的消失速度常数（k-1+k2）与形成速度常数（k1）之比.当PH、温度、离子强度不变时,Km是恒定的.

　　2意义编辑

　　米氏常数

　　图示以及公式推导.它可以表示酶和底物之间的亲和能力,Km值越大,亲和能力越弱,反之亦然.它可以确定一条代谢途径中的限速步骤：代谢途径是指由一系列彼此密切相关的生化反应组成的代谢过程,前面一步反应的产物正好是后面一步反应的底物,例如,EMP途径.限速步骤就是一条代谢途径中反应最慢的那一步,Km值最大的那一步反应就是,该酶也叫这条途径的关键酶.它可以用来判断酶的最适底物,某些酶可以催化几种不同的生化反应,叫多功能酶,其中Km值最小的那个反应的底物就是酶的最适底物.Km是一种酶的特征常数,只与酶的种类有关而与酶的浓度无关,与底物的浓度也无关,这一点与Vm是不同的,因此,我们可以通过Km值来鉴别酶的种类.但是它会随着反应条件（T、PH）的改变而改变.非竞争性抑制剂米氏常数不变,最大反应速度减小；反竞争性抑制剂米氏常数减小,最大反应速度减小

　　Km的意义及应用

　　（1）、活性中心被底物占据一半时的底物浓度.当V=1/2Vmax时,Km=[S].

　　（2）、Km是特征常数,一般只与酶的性质、底物种类及反应条件有关,与酶的浓度无关.

　　（3）、Km可近似表示表示酶与底物的亲和力

　　Km=(K2+K3)/K1=Ks+K3/K1

　　当K1、K2>>K3时,Km近似等于Ks,因此,1/Km可近似表示酶与底物的亲和力大小

　　（4）、Km与天然底物

　　Km最小或最高Vm/Km比值的底物称之为该酶的最适底物或天然底物.

　　（5）、已知Km,可根据[S]推算V,或由V推算[S]

　　（6）、了解酶的Km及[S]推知是否受[S]调节

　　（7）、用于鉴别原级同工酶、次级同工酶.

　　（8）、测定不同抑制剂对某个酶的Km值的影响判断抑制类型（非竞争性抑制剂米氏常数不变,最大反应速度减小；竞争性抑制剂米氏常数增大,最大反应速度不变.）

　　（9）、催化可逆反应的酶：测定Km和[S]推测催化反应的方向及程度.