【玉米自交系（遗传稳定的育种材料）B具有高产、抗病等优良性质，但难以直接培育成转基因植株，为使其获得抗除草剂性状，需依次进行步骤I、II试验．Ⅰ．获得抗除草剂转基因玉米自交】

　　玉米自交系（遗传稳定的育种材料）B具有高产、抗病等优良性质，但难以直接培育成转基因植株，为使其获得抗除草剂性状，需依次进行步骤I、II试验．

　　Ⅰ．获得抗除草剂转基因玉米自交系A，技术路线如图．

　　（1）为防止酶切产物自身环化，构建表达载体需用2种限制酶，选择的原则是___（单选）．

　　①Ti质粒内，每种限制酶只有一个切割位点

　　②G基因编码蛋白质的序列中，每种限制酶只有一个切割位点

　　③酶切后，G基因形成的两个黏性末端序列不相同

　　④酶切后，Ti质粒形成的两个黏性末端序列相同

　　A．①③B．①④C．②③D．②④

　　（2）如表是4种玉米自交系幼胚组织培养不同阶段的结果．据表可知，细胞脱分化时使用的激素是___，自交系___的幼胚最适合培养成愈伤组织作为转化受体．激素

　　结果

　　自交系2，4-D（2.0mg/L）6-BA（0.5mg/L）IBA（2.0mg/L）愈伤组织形成率（%）芽的分化率（%）根的诱导率（%）甲991390乙858087丙888312丁168583（3）农杆菌转化愈伤组织时，T-DNA携带插入其内的片段转移到受体细胞．筛选转化的愈伤组织，需使用含___的选择培养基．

　　（4）转化过程中，愈伤组织表面常残留农杆菌，导致未转化愈伤组织也可能在选择培养基上生长．含有内含子的报告基因只能在真核生物中正确表达，其产物能催化无色物质K呈现蓝色．用K分别处理以下愈伤组织，出现蓝色的是___（多选）．

　　A．无农杆菌附着的未转化愈伤组织

　　B．无农杆菌附着的转化愈伤组织

　　C．农杆菌附着的未转化愈伤组织

　　D．农杆菌附着的转化愈伤组织

　　（5）组织培养获得的转基因植株（核DNA中仅插入一个G基因）进行自交，在子代含G基因的植株中，纯合子占___．继续筛选，最终选育出抗除草剂纯合自交系A．

　　II．通过回交使自交系B获得抗除草剂性状

　　（6）抗除草剂自交系A（GG）与自交系B杂交产生F1，然后进行多轮回交（如图）．自交系B作为亲本多次回交的目的是使后代___．

　　（7）假设子代生活力一致，请计算上图育种过程F1、H1、H2、H3各代中含G基因植株的比例，并在图1中画出对应的折线图．若回交后每代不进行鉴定筛选，直接回交，请在图2中画出相应的折线图．

　　___

　　（8）如表是鉴定含G基因植株的4种方法．请预测同一后代群体中，4种方法检出的含G基因植株的比例，从小到大依次是___．方法检测对象 检测目标 检出的含G基因植株的比例PCR扩增基因组DNAG基因 x1分子杂交总mRNAG基因转录产物x2抗原-抗体杂交总蛋白质G基因编码的蛋白质x3喷洒除草剂 幼苗抗除草剂幼苗 x4对Hn继续筛选，最终选育出高产、抗病、抗除草剂等优良性状的玉米自交系．