生物实验总结

　　实验一观察DNA和RNA在细胞中的分布

　　实验原理：DNA绿色,RNA红色

　　分布：真核生物DNA主要分布在细胞核中,线粒体和叶绿体内也含有少量的DNA；RNA主要分布在细胞质中.

　　实验结果:细胞核呈绿色,细胞质呈红色.

　　实验二物质鉴定

　　还原糖+斐林试剂砖红色沉淀脂肪+苏丹III橘黄色

　　脂肪+苏丹IV红色蛋白质+双缩脲试剂紫色反应

　　1、还原糖的检测

　　（1）材料的选取：还原糖含量高,白色或近于白色,如苹果,梨,白萝卜.

　　（2）试剂：斐林试剂（甲液：0.1g/mL的NaOH溶液,乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液）,现配现用.

　　（3）步骤：取样液2mL于试管中→加入刚配的斐林试剂1mL（斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后再加入）→水浴加热2min左右→观察颜色变化（白色→浅蓝色→砖红色）

　　★模拟尿糖的检测

　　1、取样：正常人的尿液和糖尿病患者的尿液

　　2、检测方法：斐林试剂（水浴加热）或班氏试剂或尿糖试纸

　　3、结果：（用斐林试剂检测）试管内发生出现砖红色沉淀的是糖尿病患者的尿液,未出现砖红色沉淀的是正常人的尿液.

　　4、分析：因为糖尿病患者的尿液中含有还原糖,与斐林试剂发生反应产生砖红色沉淀,而正常人尿液中无还原糖,所以没有发生反应.

　　2、脂肪的检测

　　（1）材料的选取：含脂肪量越高的组织越好,如花生的子叶.

　　（2）步骤：制作切片（切片越薄越好）将最薄的花生切片放在载玻片中央

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　　染色（滴苏丹Ⅲ染液2～3滴切片上→2～3min后吸去染液→滴体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精）

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　　制作装片（滴1～2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片）

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　　镜检鉴定（显微镜对光→低倍镜观察→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒）

　　3、蛋白质的检测

　　（1）试剂：双缩脲试剂（A液：0.1g/mL的NaOH溶液,B液：0.01g/mL的CuSO4溶液）

　　（2）步骤：试管中加样液2mL→加双缩脲试剂A液1mL,摇匀→加双缩尿试剂B液4滴,摇匀→观察颜色变化(紫色)

　　考点提示：

　　（1）常见还原性糖与非还原性糖有哪些?

　　葡萄糖、果糖、麦芽糖都是还原性糖；淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原性糖.

　　（2)还原性糖植物组织取材条件?

　　含糖量较高、颜色为白色或近于白色,如：苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等.

　　（3)研磨中为何要加石英砂?不加石英砂对实验有何影响?

　　加石英砂是为了使研磨更充分.不加石英砂会使组织样液中还原性糖减少,使鉴定时溶液颜色变化不明显.

　　（4）斐林试剂甲、乙两液的使用方法?混合的目的?为何要现混现用?

　　混合后使用；产生氢氧化铜；氢氧化铜不稳定.

　　（5)还原性糖中加入斐林试剂后,溶液颜色变化的顺序为?浅蓝色棕色砖红色

　　（6）花生种子切片为何要薄?只有很薄的切片,才能透光,而用于显微镜的观察.

　　（7）转动细准焦螺旋时,若花生切片的细胞总有一部分清晰,另一部分模糊,其原因一般是什么?

　　切片的厚薄不均匀.

　　（8）脂肪鉴定中乙醇作用?洗去浮色.

　　（9）双缩脲试剂A、B两液是否混合后用?先加A液的目的怎样通过对比看颜色变化?

　　不能混合；先加A液的目的是使溶液呈碱性；先留出一些大豆组织样液做对比.

　　实验三观察叶绿体和细胞质流动

　　1、材料：新鲜藓类叶、黑藻叶或菠菜叶,口腔上皮细胞临时装片

　　2、原理：叶绿体在显微镜下观察,绿色,球形或椭球形.

　　用健那绿染液染色后的口腔上皮细胞中线粒体成蓝绿色,细胞质接近无色.

　　知识概要：

　　取材制片低倍观察高倍观察

　　考点提示：

　　（1)为什么可直接取用藓类的小叶,而不能直接取用菠菜叶?

　　因为藓类的小叶很薄,只有一层细胞组成,而菠菜叶由很多层细胞构成.

　　（2）取用菠菜叶的下表皮时,为何要稍带些叶肉?

　　表皮细胞除保卫细胞外,一般不含叶绿体,而叶肉细胞含较多的叶绿体.

　　（3)怎样加快黑藻细胞质的流动速度?最适温度是多少?进行光照、提高水温、切伤部分叶片；25℃左右.

　　（4）对黑藻什么部位的细胞观察,所观察到的细胞质流动的现象最明显?叶脉附近的细胞.

　　（5）若视野中某细胞中细胞质的流动方向为顺时针,则在装片中该细胞的细胞质的实际流动方向是怎样的?仍为顺时针.

　　（6）是否一般细胞的细胞质不流动,只有黑藻等少数植物的细胞质才流动?

　　否,活细胞的细胞质都是流动的.

　　（7）若观察植物根毛细胞细胞质的流动,则对显微镜的视野亮度应如何调节?

　　视野应适当调暗一些,可用反光镜的平面镜来采光或缩小光圈.

　　（8）在强光照射下,叶绿体的向光面有何变化?叶绿体的受光面积较小有一面面向光源.

　　实验四观察有丝分裂

　　1、材料：洋葱根尖（葱,蒜）

　　2、步骤：（一）洋葱根尖的培养

　　（二）装片的制作

　　制作流程：解离→漂洗→染色→制片

　　1.解离:药液:质量分数为15%的盐酸,体积分数为95%的酒精(1:1混合液).

　　时间:3~5min.目的:使组织中的细胞相互分离开来.

　　2.漂洗:用清水漂洗约3min.目的:洗去药液,防止解离过度,并有利于染色.

　　3.染色:用质量浓度为0.01g/mL或0.02g/mL的龙胆紫溶液(或醋酸洋红液)染色3~5min

　　目的:使染色体着色,利于观察.

　　4.制片:将根尖放在载玻片上,加一滴清水,并用镊子把根尖弄碎,盖上盖玻片,在盖玻片上再加一片载玻片.然后用拇指轻轻地按压载玻片.目的:使细胞分散开来,有利于观察.

　　（三）观察

　　1、先在低倍镜下找到根尖分生区细胞：细胞呈正方形,排列紧密,有的细胞正在分裂.

　　2、换高倍镜下观察：分裂中期→分裂前、后、末期→分裂间期.（注意各时期细胞内染色体形态和分布的特点）.其中,处于分裂间期的细胞数目最多.