A、在探究酵母菌呼吸方式实验中，使用溴麝香草酚蓝水溶液检测是否产生二氧化碳，而酵母菌有氧呼吸和无氧呼吸均能产生二氧化碳，因此不能通过检测溴麝香草酚蓝水溶液是否变黄来判断酵母菌的呼吸方式，A错误；

　　B、用无水乙醇分离叶绿体中的色素，可以观察到滤纸条上四条色素带，从上到下依次是橙黄色、黄色、蓝绿色和黄绿色，B错误；

　　C、观察植物根尖细胞有丝分裂时需要用盐酸和酒精的等体积混合液解离根尖，作用是使组织中的细胞相互分离开；观察DNA和RNA在细胞中的分布时需要用8%的盐酸水解细胞，C错误；

　　D、观察植物细胞质壁分离和细胞内叶绿体、线粒体形态分布实验均需保持细胞活性，D正确．

　　故选：D．