①观察洋葱根尖有丝分裂实验，细胞在解离期在由15%的盐酸和95%的酒精组成的解离液，使得细胞死亡，①错误；

　　②观察植物细胞的质壁分离及质壁复原实验中，原生质层必须保持选择透过性，如果细胞死亡将不会出现质壁分离复原，所以此实验需保证细胞处于生活状态，②正确；

　　③探究酵母菌细胞呼吸的方式，有氧进行有氧呼吸，无氧进行无氧呼吸，细胞细必须保持活性，③正确；

　　④恩格尔曼用水绵观察光合作用的场所是叶绿体，必需保持活性，如果细胞死亡，光合作用将无法进行，④正确；

　　⑤高等植物的叶绿体呈椭球状，在不同的光照条件下，叶绿体可以运动，所以细胞必须处于生活状态，⑤正确；

　　⑥观察DNA和RNA在细胞中的分布时，加入8%的盐酸进行水解，使得细胞失去活性，⑥错误．

　　故选：C．