测定DNA含量用什么方法?-查字典问答网
分类选择

来自单泉的问题

  测定DNA含量用什么方法?

  测定DNA含量用什么方法?

1回答
2020-04-24 23:16
我要回答
请先登录
连立峰

  组成核酸分子的碱基,均具有一定的吸收紫外线特性,最大吸收值在波长为250~270nm之间.核酸的最大吸收波长是260nm,这个物理特性为测定核酸溶液浓度提供了基础.

  在波长260nm紫外线下,1OD值的光密度相当于双链DNA浓度为50μg/ml;单链DNA或RNA为20μg/ml.可以次来计算核酸样品的浓度.

  分光光度法不但能确定核酸的浓度,还可通过测定在260nm和280nm的紫外线吸收值的比值(A260/A280)估计核酸的纯度.DNA的比值为1.8,RNA的比值为2.0.若DNA比值高于1.8,说明制剂中RNA尚未除尽.RNA、DNA溶液中含有酚和蛋白质将导致比值降低.270nm存在高吸收表明有酚的干扰.当然也会出现既含蛋白质又含RNA的DNA溶液比值为1.8的情况,所以有必要结合凝胶电泳等方法鉴定有无RNA.或用测定蛋白质的方法检测是否存在蛋白质.紫外分光光度法只用于测定浓度大于0.25μg/ml的核酸溶液.对于很稀的溶液可采用荧光光度法.

2020-04-24 23:21:13

最新问答

推荐文章

猜你喜欢

附近的人在看

推荐阅读

拓展阅读

  • 大家都在看
  • 小编推荐
  • 猜你喜欢
  •