A、DNA连接酶将黏性末端之间的磷酸和五碳糖连接起来，形成磷酸二酯键，A错误；

　　B、限制性核酸内切酶能识别DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，所以目的基因的获得要用限制性核酸内切酶，B正确；

　　C、目的基因不能直接导入受体细胞，需要与运载体结合，构建基因表达载体后才能导入受体细胞，C正确；

　　D、人工合成目的基因也用限制性核酸内切酶进行切割，形成粘性末端或平末端，D正确．

　　故选：A．