(2013•闵行区一模)基因工程操作步骤中,需要从受体细胞群中筛选出已获得目的基因的细胞,图1中①-③示一种筛选方法的过程.pBR322质粒含有两个抗性基因,分别是Amp(氨苄青霉素)抗
(2013•闵行区一模)基因工程操作步骤中,需要从受体细胞群中筛选出已获得目的基因的细胞,图1中①-③示一种筛选方法的过程.pBR322质粒含有两个抗性基因,分别是Amp(氨苄青霉素)抗性基因和Tet(四环素)抗性基因,其中在Tet抗性基因上有下列目的基因的插入位点(插入将导致Tet抗性基因功能性失活),请回答:
(1)图1中①过程所需的酶是______.
(2)经过①过程,ρBR322质粒可能出现的两种结果A是______.
(3)②过程表示用含四环素(使细胞停止生长,但不致死)和环丝氨酸(使生长的细胞致死)的培养基中培养细菌甲,则培养结果C表示培养基中可以存活的细菌包括______.
(4)若要进一步筛选出符合要求的受体细胞D,则③过程需要做的处理是(请参照过程②的方法)______.
(5)基因工程中使用的Ⅱ型限制性核酸内切酶通常可以识别长度为4-8个核苷酸的特异序列.下面示限制酶Sau3AⅠ对DNA片段切割的结果.
请分析,Sau3AⅠ的识别序列以及切割位点(用“↓”表示)是______.
(6)下表列出了几种限制酶的识别序列及其切割位点,图2(含两个抗性基因的质粒)和图3(含目的基因的外源DNA)中箭头表示相关限制酶的酶切位点.
限制酶XhoⅠBclⅠSalⅠBamHⅠXbaⅠ识别序列及酶切位点C↓TCGAGT↓GATCAG↓TCGACG↓GATCCT↓CTAGA据图2和图3分析,为了使目的基因和质粒实现定向连接和便于受体细胞的筛选,切割质粒的限制酶应选用______,切割含目的基因的外源DNA的酶应选用______.