下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点，图1中Cmlr表示氯霉素抗性基因，Ner表示新霉素抗性基因．请回答下列问题：限制酶MspⅠBamHⅠSma

　　下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点，图1中Cmlr表示氯霉素抗性基因，Ner表示新霉素抗性基因．请回答下列问题：

　　限制酶MspⅠBamHⅠSmaⅠHpaⅡKpmⅠ识别序列及切割位点CC↓GG

　　GG↑CC G↓GATCC

　　CCTAG↑G CCC↓GGG

　　GGG↑CCCCC↓GG

　　GGCCGGTAC↓C

　　C↑CATGG

　　（1）将提取的质粒与外源DNA分别加入缓冲液中，选用相应的限制酶处理时，影响处理效果的外界因素主要是等______（写出两点）．

　　（2）用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒时，能否使用MspⅠ与BamHⅠ同时切割质粒与外源DNA？答：______，原因是______．

　　（3）可选用______、______限制酶同时酶切质粒与外源DNA，酶切并连接后可获得______种含目的基因的重组质粒，筛选含有该重组质粒的大肠杆菌时，需要在含______的培养基上培养．

　　（4）研究发现当CCGG序列在X酶作用下，其内部胞嘧啶残基发生变化后，MspⅠ仍能识别并切割，但HpaⅡ则不能识别，而BamHI和SmaI对类似变化也十分敏感，KpnⅠ则不敏感．若在含有图1所示质粒和X酶的缓冲液中，同时加入KpnⅠ、HpaⅡ、MspⅠ和SmaⅠ并完全酶切后，则最可能得到______种DNA序列．

　　（5）为了从基因文库中分离获取T1噬菌体抗性基因，将重组质粒导入对T1噬菌体敏感的大肠杆菌，然后将含有该大肠杆菌的菌液分别接种在预先涂有______的培养基上培养，从而初步检测目的基因的表达．