回答下列基因工程的问题．100多年前，“疫苗之父”巴斯德开创了第一次疫苗革命，其特点是接种灭活或减毒的病原微生物．20世纪70年代开始，现代生物技术的迅猛发展开创了第二次疫

　　回答下列基因工程的问题．

　　100多年前，“疫苗之父”巴斯德开创了第一次疫苗革命，其特点是接种灭活或减毒的病原微生物．20世纪70年代开始，现代生物技术的迅猛发展开创了第二次疫苗革命，使疫苗的研制进入分子水平．图26是1986年通过基因工程制备乙型肝炎表面抗原（HbsAg）从而获得乙肝疫苗的过程．

　　在如图1步骤①和③的过程中，需要用合适的限制酶切割乙肝表面抗原基因和质粒．现将乙肝表面抗原基因及质粒的部分限制酶的识别序列及位置表示为图27．质粒中的启动子是质粒中基因得以正常表达所必需的部分．lacZ基因合成某种酶，该酶能将无色染料X-gal变成蓝色，最终能在无色染料X-gal的培养基上将含该基因的菌落染成蓝色．

　　限制酶EcoRBclⅠBamHⅠHindⅢ识别序列及切割位点G↓AATTCT↓GATCAG↓GATCCA↓AGCTT

　　（1）为了避免自身环化及便于筛选，则切割质粒选用的限制酶是___，切割乙肝表面抗原基因选用的限制酶是___．

　　（2）为筛选含有乙肝表面抗原的大肠杆菌细胞，需要将导入操作之后的大肠杆菌接种到含___的固体牛肉膏蛋白胨培养基上，挑选___的菌落纯化培养．

　　（3）下列有关限制酶的叙述中，正确的是___（多选）

　　A．限制酶催化的反应类型是氧化分解反应

　　B．限制酶破坏的是氢键

　　C．一种限制酶只能识别双链DNA中某种特定的脱氧核苷酸序列

　　D．EcoR酶与HindⅢ酶相比较，EcoR酶切割后DNA片段较容易分离

　　（4）在图26步骤④中，使用基因工程工具酶是___．一个乙肝表面抗原基因与一个质粒重组的过程中（图2的步骤④），游离的磷酸基团数目减少___ 个

　　（5）通过基因工程生产的疫苗与灭活或减毒的病原微生物的疫苗，在安全性方面的比较结果及理由是___．