出现非特异性扩增带

　　PCR扩增后出现的条带与预计的大小不一致,或大或小,或者同时出现特异性扩增带与非特异性扩增带.非特异性条带的出现,其原因：一是引物与靶序列不完全互补、或引物聚合形成二聚体.二是Mg2+离子浓度过高、退火温度过低,及PCR循环次数过多有关.其次是酶的质和量,往往一些来源的酶易出现非特异条带而另一来源的酶则不出现,酶量过多有时也会出现非特异性扩增.其对策有：①必要时重新设计引物.②减低酶量或调换另一来源的酶.③降低引物量,适当增加模板量,减少循环次数.④适当提高退火温度或采用二温度点法(93℃变性,65℃左右退火与延伸).