测试步骤：

　　(一)样品准备

　　1.液体样品根据用户提供的技术指标,检查浓度范围是否合适,如果需要稀释,则要考虑所需溶剂类型和稀释倍数.

　　2.固体样品均匀粉末、片状或具有光滑平面的块状样品,均可直接测定.

　　(二)操作步骤

　　1.开机：接通电源,打开主机开关,点燃(打开)光源后,根据说明书要求启动计算机.

　　2.检测前准备：参照仪器说明书,在20天内至少进行一次激发校准和发射校准,检测前仪器应预热.

　　3.工作条件的选择：环境温度应在20℃±5℃;相对湿度不大于70%;电源稳定,无磁场、电场干扰.根据样品的特性及荧光强度,选择合适的仪器工作条件(如狭缝、PM增益、响应时间等).

　　4.基本测定

　　(1)荧光激发光谱测定

　　设置仪器参数,扫描发射波长,找到maxλem,以此为发射波长,记录发射强度作为激发波长的函数,便得到激发光谱.

　　(2)荧光发射光谱测定

　　设置仪器参数,扫描激发波长,找到maxλex,以此为激发波长,记录发射强度与发射波长间的函数关系,便得到荧光发射光谱.

　　(3)差谱测定

　　设置仪器参数,选择合适的工作方式,测定背景溶液的发射光谱并储存起来,在一定的工作方式下,扫描样品溶液的发射波长,得到当时的光度值和储存的背景值之间的差示值,即差谱.

　　(4)峰面积积分

　　选择适当的工作方式,对样品溶液进行积分操作,即得到峰面积积分.

　　(5)荧光强度

　　选择合适的测量参数,设置λex、λem,采用定点读数或扫描方式,即可测得所选波长处的荧光强度.

　　(6)定量测定

　　配制一系列已知浓度的标准溶液,在一定的测定条件下,设置λex、λem,按照由稀至浓的次序,测定标准溶液的荧光强度,绘制荧光强度—浓度的工作曲线,不改变仪器参数测定未知溶液的荧光强度,由工作曲线即可求出未知溶液的浓度.

　　(三)分析结果的表述

　　1.荧光激发光谱、发射光谱以及其他光谱由仪器控制电脑直接绘出.

　　2.峰面积积分、荧光强度由仪器控制电脑计算显示.

　　3.定量测试：在相同的测定条件下,测定一系列已知浓度的标准溶液的荧光强度,绘制出荧光强度-浓度的工作曲线.浓度未知的溶液的荧光强度测定后,由工作曲线求出该溶液的浓度.

　　(四)注意事项

　　1.在实验开始前,应提前打开仪器预热,并配制好所需的溶液,对于已经配制好的溶液,在不用时放在4℃冰箱中保存,放置时间超过一星期的溶液要重新配制.

　　2.实验所用的样品池是四面透光的石英池,拿取的时候用手指掐住池体的上角部,不能接触到四个面,清洗样品池后应用擦镜纸对其四个面进行轻轻擦拭.

　　3.在测试样品时,注意荧光强度范围的设定不要太高,以免测得的荧光强度超过仪器的测定上限.

　　4.实验结束后,要及时的清理台面,处理废液,清洗和放置好样品池,将下次要用的溶液放回冰箱,并且按规定登记实验记录,养成良好的实验习惯.

　　多谢楼主详细的回答，收益了！今天第一次用了荧光分光光度计，但是我测试的样品在文献中没有查到有用荧光分光光度计来绘制标准工作曲线的，全部都是紫外分光光度计，像这样的情况紫外分光光度计所给出的一些数据对荧光分光光度计有什么指导意义吗？