A、剪去5cm根尖，用酒精和盐酸混合液解离，A错误；

　　B、实验的操作步骤是：根尖培养-取材-解离-漂洗-染色-制片-观察，B错误；

　　C、在解离时细胞已经被杀死，不能持续观察视野中的中期细胞将分裂成两个子细胞，C错误；

　　D、一个细胞周期中，间期所占时间长，分裂期所占时间短，“观察根尖分生组织细胞的有丝分裂”试验中，处于间期的细胞数目多，处于分裂期的细胞数目少，在“观察根尖分生组织细胞的有丝分裂”试验中，统计每一时期细胞数占计数细胞总数的比例，能比较细胞周期各时期的时间长短，D正确．

　　故选：D．