基因工程的诞生

　　一般认为1973年是基因工程诞生的元年

　　（S.Cohen等获得了卡那霉素和四环素双抗性的转化子菌落)

　　理论上的三大发现和技术上的三大发明

　　对于基因工程的诞生起到了决定性的作用.

　　（一）DNA是遗传物质被证实

　　1944年,AveryO.T.利用肺炎双球菌转化实验

　　1944年,美国洛克菲勒研究所的OswaldAvery等公开发表了改进的肺炎双球菌实验结果.

　　（1）S型菌细胞提取物及其纯化的DNA都可使R型菌转变成S型菌；

　　（2）经DNase处理的S型菌细胞提取物失去了转化作用.

　　（3）经胰蛋白酶处理的S型菌细胞提取物仍有转化作用.

　　不仅证实了DNA是遗传物质,而且证明了DNA可以将一个细菌的性状转给另一个细菌,他的工作被称为是现代生物科学的革命性开端.

　　（二）DNA双螺旋模型的提出

　　DNA是遗传物质已被证实,但是DNA是怎样携带并传递遗传信息的?在细胞增殖过程中,DNA是怎样复制的?因此,对于DNA结构的研究成为了当时生物学家研究的热点.

　　1953年,FrancisCrick和JamesWatson搜集了力所能及的资料,提出了DNA的双螺旋模型.随后,DNA的半保留复制和半不连续复制机理也被阐明,为基因工程的诞生奠定了坚实的理论基础.

　　（三）“中心法则”和“操纵子学说”的提出

　　既然,DNA是遗传信息的载体,那么它是如何传递遗传信息的呢?遗传信息又是如何控制生物的表型性状的呢?

　　以Nireberg等为代表的一批科学家经过艰苦的努力,确定了遗传信息以密码方式传递,每三个核苷酸组成一个密码子,代表一个氨基酸,到1966年,全部破译了64个密码子,并提出了遗传信息传递的“中心法则”.

　　1961年,JacquesMonod和FancoisJacob提出了原核基因调控的

　　操纵子模型（operonmodel）.

　　（四）工具酶的发现和应用

　　1970年Smith等分离并纯化了限制性核酸内切酶HindII,1972年,H.W.Boyer等相继发现了EcoRI一类重要的限制性内切酶.

　　1967年,世界上有五个实验室几乎同时发现DNA连接酶,特别是1970年H.G.Khorana等发现的T4DNA连接酶具有更高的连接活性.

　　1970年,Baltimore等和Temin等在RNA肿瘤病毒中各自发现了反转录酶,完善了中心法则,用于构建cDNA文库.

　　（五）载体的发现及其应用

　　载体主要是小分子量的复制子如：病毒、噬菌体、质粒.

　　1972年,美国Stanford大学的P.Berg等首次成功地实现了DNA的体外重组；

　　6、重组子导入受体细胞技术

　　1944年,肺炎链球菌被成功转化.

　　1970年,大肠杆菌才被成功转化,得益于CaCl2的应用

　　基因工程诞生

　　1973年,Stanford大学的Cohen等成功地利用体外重组实现了细菌间性状的转移.

　　1973年被定为基因工程诞生的元年.